报告摘要：本研究首先探究了含精氨酸核桃肽对东莨菪碱诱导斑马鱼记忆和认知障碍的改善作用，随后通过计算机模拟水解和控制酶解制备富含精氨酸肽段的核桃蛋白酶解产物，并对其进行功效验证。结果显示，基于核桃储藏蛋白序列设计的系列具有相对较高丰度、PeptideRanker和CPPpred评分的含精氨酸肽可显著改善东莨菪碱诱导的记忆障碍，其中调节神经递质水平和抗氧化酶活性可能是含精氨酸核桃肽发挥改善记忆作用的主要靶点。值得注意的是，精氨酸以非游离的肽段形式（而非游离精氨酸）存在时对改善记忆的贡献更大，且含精氨酸肽中正电荷及其细胞穿透特性也影响其功效。随后，核桃蛋白经胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和嗜热菌蛋白酶酶解后，可有效释放含精氨酸肽序列（结合态精氨酸含量为110.43 ± 1.58-121.82 ± 1.02 mg/g）。特别地，胰蛋白酶在计算机模拟水解中具有较强的含精氨酸肽段释放潜力，其酶解产物也被证实具有最强的改善记忆能力，表明计算机模拟水解与酶控释放相结合可能是制备含精氨酸神经保护肽的有效途径。